以牦牛曲拉为原来，采用多酶水解。柱色谱分离方法制备具有预防和改善阿 尔兹海默症的生物活性肽 AD 肽，其余的蛋白肽经过脱盐后制备多肽营养粉，通 过细胞实验和动物实验证明 AD 肽的功效。 

     （1）曲拉水解酶的筛选 曲拉采用碱溶法提取酪蛋，采用碱性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、风味 蛋白酶、中性蛋白酶和胃蛋白酶对酪蛋白进行水解。 

     （2）曲拉多酶水解酶膜连续反应器的设计 设计出酶膜连续反应器，可实现曲拉水解个肽分离的连续进行，酶膜连续反 应器由反应和分离系统、温控系统、加压系统三部分组成。

      （3）AD 肽的分离纯化鉴定及多肽营养粉的制备 经酶膜连续反应器制备出的曲拉蛋白水解物经过超滤逐级分离，分离出分子 量< 1 kDa 的组分，该部分对乙酰胆碱酯酶抑制活性最强，该组分经 Sephadex G-15 凝胶过滤色谱进行分离纯化得到对乙酰胆碱酯酶抑制活性的生物活性肽 AD 肽，采用 HPLC-MS-MS 对纯化的活性肽进行鉴定，确定肽的组成和含量。

      （4）D 肽对β-淀粉样蛋白诱导活化小胶质细胞的抑制 通过β-淀粉样蛋白（Aβ1-42）构建活化小胶质细胞模型，通过外源性添加 AD 肽进行干预，通过激光共聚焦显微镜观察细胞形态结构的变化；从分子水平 和蛋白水平分析 AD 肽如何对活化小胶质细胞的营养因子和抗炎因子等途径来保 护神经元；探究活性肽参与神经保护的信号通路，研究静息态小胶质细胞、 Aβ1-42 诱导活化小胶质细胞及 AD 肽调控的活化小胶质细胞内差异蛋白质组， 结合生物信息分析 AD 肽所涉及的细胞生长代谢过程。 。

    （5）大鼠体内实验验证 AD 肽功能 通过双侧海马内注射 Aβ1-42 构建大鼠脑组织 Aβ沉积模型；通过灌胃方式 输送 AD 肽至大鼠体内，分析体内 AD 肽对 Aβ过表达的抑制作用，通过降低脑内 神经递质 AchE 活性以及增强神经递质 ChAT 活性，进而间接改善脑内神经递质 Ach 含量以改善记忆能力；通过水迷宫研究 AD 肽对 Aβ过表达模型大鼠行为学的 影响；探究 AD 肽对 Aβ过表达模型大鼠生理、神经递质、大鼠海马体尼氏染色 及脑组织 Aβ免疫组化的变化；深入探析 AD 肽对 Aβ过表达大鼠脑组织中的关键 调节因子（NF-kBP65、COX-2、MCP-1 等）及关键蛋白（Aβ、NF-kB、PI3K 等） 的表达。

      （6）D 肽功能性乳粉及调制乳的开发 针对不同的人群需要，开发和生产出具有预防和缓解预防阿尔兹海默症功能 性乳粉和调制乳。

        AD肽是来源于曲拉的安全食品配料，可以在功能性食品中广泛使用。公司生产出AD肽主要用于中老年奶粉的配料，也可以在液态调制中使用。计划以牦牛乳为基料，开发出一系列的富含AD肽的功能性乳制品。

       多肽营养粉的主要成分是氨基酸数小于10的寡肽，寡肽易被人体吸收和利用，是非常有价值的营养素，是低过敏婴儿粉的重要配料，也是一些特殊医用食品的配料，仅多肽营养粉将生产巨大的经济效益。